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5′/3′ RACE试剂盒，第2代
5′/3′ RACE Kit, 2nd Generation
产品别名
5′/3′ RACE试剂盒，第2代
5′/3′ RACE Kit, 2nd Generation
产品性质
| usage【用途】 | sufficient for 10 reactions |
| Quality Level【质量水平】 | 100 |
| manufacturer/tradename | Roche |
| shipped in【运输】 | dry ice |
| storage temp.【储存温度】 | −20℃ (−15℃ to −25℃) |
| packaging【包装】 | 1个试剂盒包含12个组分 |
基本信息
| General description【一般描述】 | cDNA末端快速扩增(RACE)是一种用于从部分已知序列快速获得全长cDNA的常用技术。5′/3′ RACE试剂盒包含转录物逆转录酶和重组末端转移酶。转录子逆转录酶可转录全长cDNA，用于高达14 kb的55′或3′ cDNA片段的高灵敏度和快速扩增。其具有热稳定性(高达+ 65℃)，适用于具有高二级结构的高GC含量模板。使用转录物逆转录酶可以实现高灵敏度，从而实现高效的cDNA合成和长RACE产物的获得。重组末端转移酶用于将同聚A尾添加至cDNA的3′末端。poly(A)+尾可降低oligo(dT)-锚定引物所产生的不适当截短的可能性，并且可以克服相较于G / C来说较弱的A / T杂交问题.此外，在oligo(dT)-锚定引物可以与内部位点进行杂交并且截短扩增产物之前，需要一段更长的A残基片段。使用基因特异性引物和oligo(dT)-锚定引物通过PCR扩增加尾cDNA。使用嵌套的特异性引物和PCR锚定引物，通过第二次PCR进一步扩增所获cDNA，从而将RACE产物克隆到合适的载体中以用于后续研究。 |
| Specificity【特异性】 | 热灭活：终端转移酶：70℃，10分钟 转录物逆转录酶：85℃，5分钟 |
| Application【应用】 | 第二代5′/3′ RACE试剂盒适用于
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| Features and Benefits【特点和优势】 |
对照反应包括使用对照引物neo1/rev将对照RNA转录成第一链cDNA。使用对照引物neo2/rev和neo3/for进行cDNA的扩增，以获得157bp的PCR产物。使用dATP对纯化的cDNA进行加尾。用寡聚dT-锚定引物和对照引物neo2/rev进行加尾cDNA的扩增，以获得293bp的PCR产物。 |
| Other Notes【其他说明】 | 仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。 |
| Components【组分】 | 组份不可单独销售 cDNA Synthesis Buffer 5x concentrated Transcriptor Reverse Transcriptase 20 U/μl Deoxynucleotide Mix dATP, pH 7.5 (20 ℃) Reaction Buffer 10x concentrated Terminal Transferase, recombinant Control neo-RNA 1 ng/μl Oligo dT-Anchor Primer PCR Anchor Primer Control Primer neo1/rev primer 12.5 μM Control Primer neo2/rev primer 12.5 μM Control Primer neo3/for primer 12.5 μM |
安全信息
| Storage Class Code【储存分类代码】 | 12 - Non Combustible Liquids |
| WGK | WGK 1 |
