脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB )

232-667-0

MFCD00130918

NA.54

来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I已用于两种类似于脱氧核糖核酸酶I的新型人类基因的鉴定、定位和表达。来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I也已用于研究可从牛胰腺中获得高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的新方法。
DNAse I可用于切开DNA，作为将标记碱基插入DNA的第一步。来自Sigma的酶已在Madin-Darby犬肾(MDCK)II细胞系的细胞裂解物制备中与RNAse一起用于核酸酶的储备。它也用于从辛德比斯病毒中提取RNA。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。

DNase I是一种内切核酸酶，可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg²⁺存在时，DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn²⁺存在时，两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。最适pH在7-8之间。二价阳离子如Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺以及Zn²⁺都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca²⁺可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A，B，C和D组成，它们的摩尔比分别为4:1:1。仅有少量的D被发现。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时，在 pH 5.0，25℃的条件下在每ml每分钟内可引起0.001的A₂₆₀变化。

含有氯化钙

酶粉可使用水或除磷酸盐缓冲液外任何pH 4.0-9.0的缓冲液进行重悬。应避免钙螯合剂。溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 ℃一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 ℃则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时，它可在60 ℃维持活性最长达五小时，并在68 ℃ <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液((pH 7.2)，1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

蛋白由双缩脲法测定。

300

Type II

lyophilized powder

≥2,000 units/mg protein

~31 kDa

chromatography

Protein, ≥80%

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear

diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing

Chymotrypsin ≤0.01%
Protease ≤0.005%
RNase ≤0.01%

wet ice

−20℃

10000 units in glass bottle
20000, 40000, 200000, 500000 units in poly bottle

GHS08

Danger

H334

P261 - P284 - P304 + P340 + P312 - P501

Resp. Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 3