抗NeuN抗体，克隆A60

32160702

NA.41

NeuN抗体(神经元核；克隆A60)可特异性地识别DNA结合的神经元特异性蛋白NeuN，它存在于所有被测脊椎动物的大多数CNS和PNS神经元细胞中。NeuN蛋白的分布明显局限于胎儿和成人大脑中的神经元细胞核、核周体和一些近端神经元突起，但有些神经元在所有年龄段都不能被NeuN识别：例如，INL视网膜细胞、Cajal Retzius细胞、Purkinje细胞、下橄榄核和齿状核神经元以及交感神经节细胞(Mullen等人，1992；Wolf等人，1996)。免疫组化检测的NeuN蛋白首先出现在神经元从细胞周期中退出和/或与神经元终末分化开始所对应的发育时间点(Mullen等人，1992)。免疫反应性出现在小鼠神经管中的E9.5附近，广泛存在于发育中的神经系统中。强核染色代表核调节蛋白的功能；但是，目前还没有证据表明NeuN蛋白抗原在远端细胞质中是否有功能，或者它是否只是在转运回细胞核之前在远端细胞质中合成的。从纯化的细胞核中分离出的蛋白质与免疫印迹上的全脑提取物之间没有差异(Mullen等人，1992)。

MILLIPORE针对脊椎动物神经元特异性核蛋白NeuN(或神经元核)的独有单克隆抗体可与小鼠整个神经系统的大多数神经元细胞类型反应，如小脑、大脑皮层、海马、丘脑、脊髓、包括背根神经节、交感神经链神经节和肠神经节在内的外周神经系统神经元。′在发育过程中，首先在神经元发生有丝分裂后不久观察到免疫反应性，在增生区未观察到染色。免疫组化染色主要位于神经元的细胞核，细胞质染色较浅。少数不与MAB377反应的细胞类型包括浦肯野细胞、二尖瓣细胞和感光细胞。该抗体是原代培养和视黄酸刺激的P19细胞的极佳神经元标记物。它还可用于识别移植物中的神经元。

纯化小鼠脑细胞核

研究类别
神经科学
蛋白质印迹分析：
前一批抗体在46-48 kDa范围内识别出2-3个条带，可能在66 kDa左右识别出另一条带。

免疫细胞化学：
使用先前批次的1:10-1:100稀释液。培养的神经元应使用0.1％ Triton X-100渗透。所应使用仅含有缓冲液和一抗、不含多余蛋白块或洗涤剂的简单溶液对一抗进行稀释。

免疫组化：
1:100-1:1,000。该抗体在聚酯蜡包埋组织上效果最好，但也能以较低的工作稀释度在石蜡包埋组织上发挥作用。该抗体可与甲醛固定剂很好地结合。成功应用了柠檬酸和微波预处理(Sarnat，1998)。

免疫组化(石蜡)分析：前一批用于IH(P)。

最佳工作稀释度必须由最终用户确定。
研究子类别
神经 & 胶质标记
抗NeuN抗体，克隆A60可检测NeuN水平，已发表并经验证可用于FC、IC、IF、IH、IH(P)、IP和WB。

采用免疫组化法对脑组织进行常规评估。

免疫组化(石蜡)分析：
用pH 6.0的柠檬酸盐预处理的组织。使用带有HRP-DAB的IHC-Select Detection将这批抗体稀释至1:100。 免疫反应性表现为颗粒层神经元的核染色。 要注意的是，在浦肯野细胞的细胞核中没有检测到信号。
pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液的最佳染色，抗原表位检索：大鼠小脑

形式：纯化
纯化的蛋白 A
纯化小鼠免疫球蛋白IgG1的缓冲液溶液，含有0.02 M 磷酸盐缓冲液、0.25 M NaCl和0.1%叠氮化钠，pH 7.4。

对照
阳性对照 - 脑组织。阴性对照 - 任何非神经元组织，例如成纤维细胞

浓度：请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

100

mouse

purified immunoglobulin

primary antibodies

A60, monoclonal

human, salamander, pig, chicken, mouse, ferret, avian, rat

Chemicon^®

flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

IgG1

wet ice

46/48 kDa

自收到之日起在2-8ºC可稳定保存6个月。

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