蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌

3.4.21.64 ( BRENDA | IUBMB )

254-457-8

MFCD00132129

来自真菌白色念球菌的蛋白酶K(PK)是一种40 kDa的编码蛋白。其N-末端前肽区与细菌枯草杆菌显示出了同源性。PK甚至可在航天飞机任务中的微重力条件下也会结晶。PK是研究蛋白质工程过程的一种有效蛋白系统。

由蛋白酶K消化而产生的蛋白酶足迹可揭示蛋白间的表面相互作用。来自Sigma的酶已被用于鸡胚的预杂交步骤。它也已被用于富集PrPSc，一种存在于绵羊、仓鼠和小鼠瘙痒病样本中的朊病毒蛋白。
在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
在分离DNA和RNA的过程中，蛋白酶K对核酸酶的蛋白水解失活起作用。
它可用于去除与溶菌酶和核糖核酸酶A等阳离子蛋白结合的内毒素。
它可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体，并用于确定膜上的酶定位
它可用于处理石蜡包埋的组织切片以暴露抗原结合位点而进行抗体标记，并在可传播的海绵状脑病(TSE)研究中消化来自脑组织样本的蛋白以获取朊病毒。产品SAE0009以冻干粉形式提供。产品SAE0009已被用于分解人晶状体蛋白¹。

蛋白酶K具有广泛的特异性，即使在自然状态下也会降解许多蛋白质。它主要裂解与脂肪族羧基相邻的肽键，以及带有封闭的 a-氨基的芳香族氨基酸。最佳 pH 值为 7.5-9.0，等电点为 8.9。激活需要Ca²⁺(1-5mM)。蛋白酶K可被二异丙基氟磷酸盐(DFIP)和苯基甲磺酰氟(PMSF)抑制。
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp³⁹-His⁶⁹-Ser²²⁴)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

在 pH7.5，37℃ 下，一个单位的酶将水解尿素变性血红蛋白，并产生相当于每分钟 1.0 μmole 酪氨酸的颜色(Folin-Ciocalteu 试剂的颜色)。

lyophilized powder

200

≥30 units/mg protein

28.93 kDa

DNAse, RNAse, none detected.

−20℃

GHS08

Danger

H315 - H319 - H334

P261 - P264 - P280 - P284 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2

11 - Combustible Solids

WGK 1